Extraccion de acidos nucleicos pdf
Métodos de extracción de ácidos nucleicos ppt
Muchas industrias extraen ADN para una mejor comprensión y aplicación de ese ADN. ¿Cuáles son algunos de los usos más comunes de la extracción de ADN? Obtenga más información sobre las distintas formas en que las industrias utilizan el ADN que extraen.
Los equipos forenses suelen utilizar el ADN para determinar si una persona es sospechosa o si debe ser eliminada como sospechosa. En ocasiones, el ADN puede demostrar la inocencia o culpabilidad de una persona o, al menos, puede demostrar si una persona se encontraba en las proximidades del lugar del delito.
La extracción de ADN también es útil para determinar la paternidad de un niño. Independientemente de que una persona quiera demostrar que es o no el padre, el ADN tanto del posible padre como del bebé puede ayudar a probar o refutar las afirmaciones de una persona sobre la paternidad.
Además de ayudar a una persona a saber quiénes son sus antepasados inmediatos, la extracción de ADN también puede ayudar a una persona a comprender los lugares de los que proceden sus antepasados más remotos. Con los modernos kits de ADN, una persona puede conocer todos los países de procedencia de sus antepasados, así como los parientes vivos que puedan seguir viviendo e incluso algunas afecciones médicas o alimentarias a las que una persona esté predispuesta.
Extracción con fenol/cloroformo
ResumenDesde que se descubrió la Taq ADN polimerasa termoestable en 1987, las técnicas de amplificación de ácidos nucleicos han avanzado mucho y han contribuido enormemente al progreso de las ciencias de la vida. Estas técnicas se introdujeron en el laboratorio clínico y han producido grandes cambios en las herramientas y pruebas de diagnóstico. En particular, se han producido muchos avances innovadores en las pruebas moleculares en el campo de la microbiología diagnóstica.Palabras claveEstas palabras clave han sido añadidas por máquina y no por los autores. Este proceso es experimental y las palabras clave pueden actualizarse a medida que mejore el algoritmo de aprendizaje.
Extracción inorgánica de adn
ResumenLos laboratorios actuales de biología molecular dependen en gran medida de la purificación y manipulación de ácidos nucleicos. Sin embargo, los protocolos habituales basados en centrifugadoras y columnas requieren equipos especializados, a menudo utilizan reactivos tóxicos y no son económicamente escalables ni prácticos para su uso con un alto rendimiento. Aunque se sabe desde hace tiempo que las microesferas magnéticas pueden ofrecer una respuesta elegante a estos problemas, el desarrollo de protocolos de código abierto basados en microesferas ha sido limitado. En este artículo, ofrecemos instrucciones paso a paso para una síntesis sencilla de microesferas magnéticas funcionalizadas, y protocolos detallados para su uso en la purificación de alto rendimiento de plásmidos, ADN genómico, ARN y ácido nucleico total (ANT) a partir de una serie de fuentes bacterianas, animales, vegetales, medioambientales y sintéticas. También ofrecemos un protocolo basado en microesferas para la conversión en bisulfito y la selección del tamaño de fragmentos de ADN y ARN. La comparación con otros métodos pone de manifiesto la capacidad, versatilidad y extrema rentabilidad del uso de microesferas magnéticas. Estos protocolos de código abierto y la página web asociada (https://bomb.bio) pueden servir de plataforma para una mayor personalización de los protocolos y la participación de la comunidad.
Evolución de los métodos de extracción de ADN
ResumenLa complejidad de los métodos actuales de aislamiento de ácidos nucleicos limita su uso fuera del entorno del laboratorio moderno. Aquí describimos un método rápido y asequible para purificar ácidos nucleicos a partir de muestras animales, vegetales, víricas y microbianas utilizando una varilla de celulosa. Los ácidos nucleicos pueden purificarse sumergiendo las varillas de fabricación propia en sólo tres soluciones: el extracto (para unir los ácidos nucleicos), un tampón de lavado (para eliminar impurezas) y la reacción de amplificación (para eluir los ácidos nucleicos). La rapidez y sencillez de este método lo hacen idóneo para aplicaciones moleculares, tanto dentro como fuera del laboratorio, incluidos entornos con recursos limitados, como lugares remotos sobre el terreno e instituciones de enseñanza. Se proporcionan instrucciones detalladas para fabricar fácilmente grandes cantidades de dipsticks en casa. Siguiendo las instrucciones, los lectores pueden crear más de 200 dipsticks en menos de 30 minutos y realizar purificaciones de ácidos nucleicos basadas en dipsticks en 30 segundos.
En la publicación original de las tiras reactivas, se utilizó Tris 10 mM (pH 8,0), Tween 20 0,1% (vol/vol) como tampón de lavado. Desde entonces, hemos descubierto que el Tween 20 puede interferir negativamente en las reacciones de amplificación del ADN, por lo que recomendamos eliminarlo del tampón de lavado.